Հատուկ գործունեություն եւ դրա կարեւորությունը սպիտակուցի մեկուսացման մեջ

Հատուկ գործունեություն է տերմին, որն օգտագործվում է ֆերմենտի ռեակցիայի արագությունը չափելու համար: Հատուկ ֆերմենտային գործունեություն (կարճատեւ կոնկրետ գործունեություն) ֆերմենտային մաքրության միջոց է եւ մեջբերված որպես միավոր / մգ : Արժեքը ավելի մեծ է, քանի որ ֆերմենտի պատրաստումը դառնում է ավելի մաքուր, քանի որ սպիտակուցի չափը (մգ), սովորաբար, պակաս է, բայց ռեակցիայի արագությունը մնում է նույնը (կամ կարող է աճել `նվազեցված միջամտության կամ կանխարգելիչ միջոցների վերացման պատճառով):

Չափման ֆերմենտային կինետիկա

Որպես ֆոնին, ֆերմենտները սպիտակուցներ են, որոնք հանդես են գալիս որպես կատալիզատորներ ռեակցիայի առաջացման ակտիվացման էներգիայի քանակի նվազեցման համար: Ակտիվացման էներգիան այն էներգիան է, որը պահանջվում է ռեակցիաների համար «սկսել», քանի որ շատ ռեակցիաները շատ արագ չեն առաջանում (կամ ընդհանրապես տեղի են ունենում), եթե դրանք տերմոդինամիկ հնարավոր են:

Ֆերմենտները որոշակի վայրում հատուկ ռեակցիաները կատալիզացնում են (հայտնի է որպես ակտիվ վայր), որտեղ ռեանիմատները կապում եւ արձագանքում են արտադրանքը առաջացնելու համար: Substrates- ն ունեն ակտիվ կայքեր, որոնք հատուկ են միայն նրանց, այնպես որ ոչ մի այլ նյութ չի կապում կամ նույն տեղում չի արձագանքում: Ինչպես փական եւ բանալին, ամեն ֆերմենտը կարող է կատալիզացնել միայն մեկ կոնկրետ արձագանք (որոշ բացառություններով):

Սպիտակուցի մեկուսացման մեթոդներով հատուկ գործունեություն է կատարվում `նշելու մաքրման տոկոսը: Կարեւոր է իմանալ այս միավորը, երբ գնել է ֆերմենտներ, ցույց տալու համար, թե որքան մաքուր ֆերմենտ եք ստանում:

Երբ ֆերմենտային կինետիկայի չափումը (ֆերմենտի ենթաբազմությամբ կամ մակերեսով ռեակցիայի արագությունը) որոշվում է որպես ֆերմենտի նորադարձների (ռեակցիաների կատալիզացված) նյութը, ըստ ֆերմենտի մեկ մգ սպիտակուցի, ըստ ժամանակի միավորի:

Հատուկ գործունեության օրինակ կարող է լինել.

• Մեկուսացված ֆերմենտի կոնկրետ ակտիվությունը չափվել է 150 րոլ / մգ / սպիտակուցի սպիտակուցից եւ մաքրման հետո 800 րոպոլ / մգ / մգ:

Հատուկ գործունեությունը ֆերմենտային մաքրության կարեւորագույն միջոցն է: Մաքուր ֆերմենտի տարբեր խմբաքանակները պետք է ունենան նույն արժեքները եւ անգամ զուգահեռացնում են ֆերմենտի լուծումը, քանի որ շատ անգամներ ունենան նույնական կոնկրետ գործունեության արժեքներ, չնայած որ դրանք կլինեն տարբեր ֆերմենտի գործունեության արժեքներ: Սա է, քանի որ կոնկրետ գործունեության հաշվարկվում է հավասարաչափ ազդանշանը (միավոր / մլ) եւ դենոմինատորը (մգ / մլ):

Հատուկ գործունեությունը շատ տարբեր է գործունեությունից, սակայն կոնկրետ գործունեության հաշվարկը դեռ կախված է գործունեության արժեքից: Սա նշանակում է, որ նշված գործունեության արժեքը նույնպես կախված կլինի ֆերմենտի միավորի սահմանմանը:

Enzymes- ի բաղադրամասերը, որոնք ակնկալվող ցածր կոնկրետ ակտիվության արժեքից կարող են պարունակել ֆերմենտային մոլեկուլներ, որոնք փոխվել են կամ խառնվում են լվացքի հետ:

Ֆերմենտային գործունեության վրա ազդող գործոններ

Հնարավոր է, որ մեկ ֆերմենտը կարող է ունենալ տարբեր չափվող ակտիվության արժեքներ, երբ չափվում են տարբեր լաբորատորիաներում (այսինքն, չափված ակտիվության իրական տարբերություններ, այլ տարբեր միավորի սահմանումների օգտագործման հետեւանքով ակնհայտ տարբերություններ):

Փորձաքննության ձեւը (ֆերմենտների մաքրության որոշման փորձարկման մեթոդը) ազդելու է հաշվետվող գործունեության արժեքներին: Օրինակ, ֆերմենտները հիմնականում ավելի ակտիվ են 37 աստիճան ջերմաստիճանի միջեւ, քան 20 աստիճան Ցելլիուսում, հետեւաբար, եթե փորձաքննությունը կատարվում է 21 աստիճան Celsius- ում, արժեքները տարբերվում են 32 աստիճան Celsius- ի (սովորաբար , փորձարկումները կատարվում են 20-37 աստիճան ջերմաստիճանի միջեւ):

Այսպիսով, ֆերմենտի միավորի սահմանումը ավելի լավ կլիներ, քանի որ 1 միավոր (U) հանդիսանում է ֆերմենտի քանակությունը, որը կատալիզացնում է 1 նմոլ սուբստատի մեկ րոպեի ռեժիմը ստանդարտ պայմաններում: