Այս բուֆերները կարող են օգտագործվել կենսաբանական կիրառման համար մոտ չեզոք պհ
Ֆոսֆորի թթու երեք քիմիական արժեքը (ՔԿՀ-ի քիմիայի եւ ֆիզիկայի ձեռնարկից) կազմում են 2.16, 7.21 եւ 12.32: Մոնոսոդիումի ֆոսֆատը եւ նրա միաձուլման հիմքը, դիսոդիումի ֆոսֆատը սովորաբար օգտագործվում են 7 բջիջների բուֆերների համար, որոնք ցույց են տրված կենսաբանական կիրառման համար:
Այս բուֆերի ստեղծումը մի փոքր դժվար է, քան TAE- ի եւ TBE- ի բուֆերների դարձնելը: Այն, սակայն, չափազանց դժվար է: Պարզապես միջին: Այն պետք է տեւի մոտավորապես 10 րոպե, որպեսզի բռնի բուֆեր: Ահա թե ինչպես:
1. Որոշեք բուֆերային հատկությունների վրա
Նախքան բուֆեր պատրաստելը, նախ պետք է իմանաք, թե ինչ չափաբաժին եք ուզում այն, ինչ ծավալի է եւ ինչ ցանկալի pH- ն է: Բուֆերի մեծ մասը աշխատում է առավելագույնը 0,1-ից մինչեւ 10 մ-ի կոնցենտրացիաներում: pH- ը պետք է լինի pK- ի թթվի / կոնջջի բազայի 1 pH միավորի սահմաններում: Պարզության համար այս նմուշի հաշվարկը կլինի 1 լիտր բուֆերի համար:
2. Որոշեք թթու հարաբերակցության հիմքը
Օգտագործեք Henderson-Hasselbalch հավասարումը (ստորեւ) `պարզելու համար, թե թթվից բազային հարաբերակցությունը պահանջվում է ցանկալի pH- ի բուֆեր: Օգտագործեք pKa- ի արժեքը մոտավոր ձեր ցանկալի pH- ում եւ հարաբերակցությունը կանդրադառնա թթու-բազային զուգահեռ զույգին, որը համապատասխանում է այդ pKa- ին:
HH հավասարման: pH = pKa + log ([Base] / [Acid])
PH 6.9 բուֆերի համար [Base] / [Acid] = 0.4898
Փոխարինեք [acid] եւ լուծիր [Base]
Բուֆերի ցանկալի մոլյոլիտը [Acid] + [Base] գումարն է:
1 Մ բուֆերի համար [Base] + [Acid] = 1 եւ [Base] = 1 - [Acid]
Դրանք փոխարինելով հարաբերական հավասարման մեջ, 2-րդ քայլից ստացեք:
[Acid] = 0.6712 մոլ / լ
Լուծել [acid]
Օգտագործելով հավասարումը `[Base] = 1 - [Acid], կարող եք հաշվարկել հետեւյալը.
[Base] = 0.3288 մոլ / լ
3. Խառնել թթվային եւ կոնյուկոզայի հիմքը
Հենդերսոն-Հասելբալչի հավասարման օգտագործման համար հաշվարկելու համար, թե թթվից մինչեւ հիմք է պահանջվում ձեր բուֆերի համար, նախապատրաստեք ընդամենը 1 լիտր լուծույթ, օգտագործելով ճիշտ մոնոսոդիֆոսֆատ եւ դիսոդիում ֆոսֆատ:
4. Ստուգեք pH- ը
Օգտագործեք pH- ի հետաքննություն, հաստատելու համար, որ բուֆերի համար ճիշտ pH է հասնում: Կարգավորեք մի փոքր անհրաժեշտության դեպքում, օգտագործելով ֆոսֆորական թթու կամ նատրիումի հիդրօքսիդի (NaOH):
5. Ճշգրտել ճշգրտությունը
Ցանկացած pH- ի հասնելուց հետո բերել բուֆերի ծավալը մինչեւ 1 լիտր: Այնուհետեւ զտեք բուֆերը `ցանկալի: Այս նույն բուֆերը կարող է զտված լինել 0,5 Մ, 0,1 M, 0,05 Մ կամ որեւէ բուֆեր ստեղծելու համար:
6. Բուֆերի համար խորհուրդներ
Հիշեք, որ pKa- ն հեշտությամբ չի չափվում ճշգրիտ արժեքով: Փոքր տարբեր արժեքներ կարող են հասանելի լինել տարբեր աղբյուրներից գրականության մեջ:
7. Ինչն է անհրաժեշտ
Բուֆեր ստեղծելու համար անհրաժեշտ է երեք նյութ, իսկ մնացած նյութերը սարքավորում են: Նյութերը մոնոսոդիումի ֆոսֆատ, դիսոդիում ֆոսֆատ եւ ֆոսֆորական թթու կամ նատրիումի հիդրօքսիդ `մոնտաժելու համար:
Դուք նաեւ պետք է pH մետր եւ զոնդ եւ համապատասխան լաբորատորիա: Սա ներառում է ծավալային շերտ, ավարտված բալոններ, խեցեգործներ եւ խառնուրդներ:
Վերջապես, ձեզ հարկավոր է բորբոքված թեփ.