Այս բուֆերը օգտագործվում է ԴՆԹ շարժման ուսումնասիրության համար
Այս բուֆերը ունի ցածր իոնային ուժ եւ ցածր բուֆերային հզորություն: Այն լավագույնս համապատասխանում է ԴՆԹ-ի խոշոր (> 20 կբ) կտորների էլեկտրոֆորեզին եւ պետք է հաճախ փոխարինվի կամ ավելի երկար (> 4 ժամ) գելային ժամանակաշրջանի համար:
Այդ մտքում, դուք կարող եք հաշվի առնել բուֆերի մի քանի խմբաքանակ:
Հաշվի առնելով, որ բուֆերը շատ հեշտ է անել եւ քայլերը կարող են արագ իրականացնել, միաժամանակ մեկից ավելի փաթեթներ չպետք է հատկապես ժամանակատար կամ դժվար է քաշել: Օգտագործելով ստորեւ բերված հրահանգները, այն պետք է տեւի ընդամենը 30 րոպե TAE բուֆեր կատարելու համար: Ահա թե ինչպես:
Պատրաստել EDTA- ի ֆոնդային լուծույթ
Ժամանակի ընթացքում պատրաստվում է EDTA (ethylenediamine tetraacetic acid) լուծումը: EDTA- ն ամբողջությամբ չի լուծվի, մինչեւ pH- ն ճշգրտվի մինչեւ մոտ 8.0: 0.5 ՄԵԹԹ-ի 500 միլիլիտր ֆոնդային լուծույթի համար կշռում են 93.05 գրամ EDTA դիսիդոլի աղ (FW = 372.2): Լուծել 400-միլիլիտր դեոնացված ջրի մեջ եւ կարգավորել pH- ը նատրիումի հիդրոքսիդով (NaOH): Հավաքեք 500 միլիլիտրի վերջնական ծավալը:
Քայլեք մինչեւ TAE ֆոնդային լուծում
Կատարել TAE- ի կենտրոնացված (50x) ֆոնդային լուծույթ, քաշելով 242 գրամ Tris բազան (FW = 121.14) եւ լուծարել այն մոտ 750 լիտր դեոնացված ջրի մեջ:
Զգուշորեն ավելացրեք 57.1 միլիլիտր սառցադաշտային թթու եւ 0.5 միլիոն EDTA (pH 8.0) 100 միլիլիտր: Դրանից հետո կարգավորեք լուծումը վերջնական ծավալը 1 լիտր: Այս բաժնետիրական լուծումը կարող է պահվել սենյակային ջերմաստիճանում: Այս բուֆերի pH- ն չի կարգավորվում եւ պետք է լինի մոտ 8.5:
Պատրաստել TAE- ի աշխատանքային լուծում
1x TAE- ի բուֆերի աշխատանքային լուծումը կատարվում է ուղղակի լուծույթով, 50 րոպե ջրի մեջ ջնջելով:
Վերջնական լուծույթի կոնցենտրացիաները 40 մմ են: Tris-acetate եւ 1 մմ EDTA: Բուֆերը այժմ պատրաստ է օգտագործելու ծղոտե գել:
Ինչ պետք է բուֆերի համար
Քանի որ TAE բուֆեր ստեղծելու համար պահանջվում է միայն արագ եւ պարզ հրահանգներ, դրա համար անհրաժեշտ նյութերի քանակն ավելորդ չէ: Դուք պարզապես անհրաժեշտ է EDTA դիոդիումի աղի, Tris բազայի եւ սառցադաշտային քացախի թթու:
Կատարելու բուֆերը նաեւ պահանջում է pH չափիչ եւ ստիբուլացման ստանդարտներ: Ձեզ նույնպես պետք է 600 միլիլիտր եւ 1500 միլիլիտր խմիչքներ կամ շշեր, ինչպես նաեւ ավարտել բալոններ: Վերջապես, դուք պետք է deionized ջուր, խառնել շերտերով եւ ակտիվացնել թիթեղները:
Փաթեթավորումը
Որտեղ եք նախատեսում դարձնել բուֆեր, դպրոցական վայրում, աշխատանքային վայրում կամ այլ վայրում, ինչպիսին է ձեր տանը: Ստուգեք գույքագրումը նախքան սկսեք համոզվել, որ դուք ունեք TAE բուֆերի համար վերը նշված բոլոր նյութերը:
Եթե նախընտրում եք վճարել նյութերի համար, ապա ձեր ընտանիքի բյուջե կատարելու համար առաջարկվում է առաջարկվել: Դուք հեշտությամբ կարող եք պատվիրել այն նյութերը, որոնք անհրաժեշտ են առցանց կամ այցելեք մասնագիտացված խանութ: