Ինչպես կատարել ֆոսֆատ բուֆերացված սալին

Ինչպես կատարել այս իմունխոստոկիմիական սահուն բուֆերը

Ֆոսֆատ բուֆերացված աղի (PBS) - բուֆերային լուծույթ, որը սովորաբար օգտագործվում է իմունոգեւոր քիմիական (IHC) գունանյութի համար եւ հաճախ օգտագործվում է կենսաբանական հետազոտության մեջ: PBS- ը ջրային հիմքով աղ լուծում է, որը պարունակում է նատրիումի ջրածնային ֆոսֆատ, նատրիումի քլորիդ եւ, որոշ դեպքերում, կալիումի քլորիդ եւ կալիումի դիձիձեն ֆոսֆատ:

Իմունահիստոկիմիական պառկած

Իմունհամեստոկիմիան վերաբերում է այնպիսի հակիչենների հայտնաբերման գործընթացին, ինչպիսիք են հյուսվածքների բջիջներում սպիտակուցները `օգտագործելով կենսաբանական հյուսվածքներում հակագրոհների համար հատուկ հակատիտների սկզբունքը:

Immunofluorescent staining էր առաջին immunohistochemical staining մեթոդ.

Անտիգենները տեսանելի են դառնում, երբ հակաբիոտիկներով հակաբիոտիկները օգտագործվում են ֆլուորեսցենտային ներկերի միջոցով `հակագեն-հակադրման պարտադիր ռեակցիայի պատճառով Այս պրոցեսը տեղի է ունենում այն ​​ժամանակ, երբ այն ակտիվանում է սպեկտրալույքի որոշակի լույսով, ֆլուորեսցենտային մանրադիտակի տակ:

Լուծումների osmolarity եւ իոնային կոնցենտրացիաները համապատասխանում են մարդու մարմնի, նրանք իզոտոնիկ են:

PBS- ի բաղադրատոմսը

Դուք կարող եք PBS պատրաստել մի քանի եղանակներով: Կան բազմաթիվ բանաձեւեր: Նրանցից ոմանք չեն պարունակում կալիում, իսկ մյուսները պարունակում են կալցիում կամ մագնեզիում :

Այս բաղադրատոմսը համեմատաբար հեշտ է: Դա 10X PBS լուծույթի համար է (0.1M): Այնուամենայնիվ, դուք կարող եք նաեւ կատարել 1X ֆոնդային լուծում, կամ սկսեք այս 10X բաղադրատոմսով եւ զտեք այն 1X:

Ամբողջ գործընթացը տեւում է մոտ 10 րոպե:

Նաեւ տրամադրվում է Tween- ի ավելացման տարբերակ:

Ինչ պետք է կատարել PBS բուֆեր

• Նատրիումի ֆոսֆատ մոնոբազիկ (անջուր)

• Նատրիումի ֆոսֆատ dibasic (անջուր)
• Նատրիումի քլորիդ
• Scale եւ կշռել նավակներ
• Մագնիսական խառնաշփոթ եւ խառնուրդը
• PH- ի հետախույզ, որը ստուգվում է եւ համապատասխան լուծումներ է պարունակում pH կարգավորելու համար
• 1 լ ծավալային շշով
• Tween 20 (ըստ ցանկության)

Ինչպես կատարել ֆոսֆատ բուֆերացված աղի (PBS)

Քաշը տատանվում է 10.9 գ անջիճ նատրիումի ֆոսֆատ dibasic (Na2HPO4), 3.2 գ անջխմոր նատրիումի ֆոսֆատ մոնոբազիկ (NaH2PO4) եւ 90 գ նատրիումի քլորիդ (NaCl):

Պարունակվում է միայն 1 լ ջրի տակ:

Կարգավորել pH- ից մինչեւ 7.4 եւ լուծումը հասցնել 1 լ վերջնական ծավալին:

Խառնել 10X օգտագործելուց եւ անհրաժեշտության դեպքում pH վերականգնելուց:

Դուք կարող եք 0.5% Tween 20 պարունակող PBS լուծում կատարել, ավելացնելով 5 մլ Tween 20 1L լուծմանը:

PBS բուֆերի պատրաստման խորհուրդներ

Պահել բուֆերը սենյակային ջերմաստիճանում PBS լուծումը կատարելուց հետո:

Անխուսափելի ռեակտիվները կարող են փոխարինվել, բայց դուք պետք է վերագնահատեք համապատասխան մասշտաբի զանգվածը, տեղավորելու համար ավելացված ջրային մոլեկուլները:

Ֆոսֆատի բուֆերացված աղի օգտագործումը (PBS)

Ֆոսֆատ բուֆերացված աղի օգտագործումը շատ օգտակար է, քանի որ այն շատ տարանջատված է եւ ոչ թունավոր: Այն կարող է օգտագործվել նյութերի զտման համար եւ հաճախ օգտագործվում է լվանալ բջիջների բեռնարկղերը: PBS- ն կարող է օգտագործվել որպես տարբեր մեթոդներով խառնուրդ `երկօքսիդները չորացնելու համար, քանի որ դրա մեջ ջրի մոլեկուլները կառուցված կլինեն նյութի սպիտակուցի շուրջ: Դա կլինի «չորացնել» եւ անշարժացնել ամուր մակերեսին:

PH- ն մնում է կայուն եւ հետեւողական, կանխելու բջիջների ոչնչացումը:

Ջուրի բարակ ֆիլմը, որը կապում է նյութը, խոչընդոտում է denaturing կամ այլ կոնֆորմացիոն փոփոխություններ: Կարբոնատ բուֆերները կարող են օգտագործվել նույն նպատակների համար, սակայն ավելի քիչ արդյունավետությամբ:

PBS- ն կարող է օգտագործվել նաեւ էլլիպոմետրերի մեջ սպիտակուցի adsorption- ի չափման համար դիմել սպեկտրի սպեկտրին: