Իմացեք RFLP- ի եւ ԴՆԹ-ի վերլուծության կիրառման մասին

Սահմանափակման հատվածի երկարության պոլիմորֆիզմը (RFLP) գենետիկական անալիզի մոլեկուլային մեթոդ է, որը թույլ է տալիս անհատներին հայտնաբերել ԴՆԹ-ի որոշակի շրջաններում ֆերմենտի սահմանափակումների յուրօրինակ օրինակներ:

Նաեւ անդրադարձ է կատարվել «Ռադիոկապի վերլուծություն» մեթոդին, տեխնիկան օգտվում է առանձին մարդկանց գենետիկ կոդերի պոլիմորֆիզմներից : Չնայած որ մի տեսակի բոլոր անդամները հիմնականում ունեն նույն գենետիկական դիմահարդարումը, այդ փոքր տարրերը հաշվի են առնվում ֆենոտիպի տատանումները, ինչպիսիք են արտաքին տեսքը կամ նյութափոխանակությունը, անհատների միջեւ:

RFLP: վերլուծության տեխնիկան եւ կիրառումը

RFLP վերլուծության տեխնիկան ներառում է ԴՆԹ - ի որոշակի շրջանի կտրվածք `հայտնի փոփոխականությամբ, սահմանափակման ֆերմենտներով, այնուհետեւ բաժանելով ԴՆԹ-ի բեկորները` agaroze- ի գել էլեկտրոֆորեզի միջոցով եւ որոշելով բեկորների եւ հարաբերական չափերի քանակությունը:

Սահմանափակման ֆերմենտը ֆերմենտ է, սպիտակուցային մոլեկուլ, որը կրճատում է ԴՆԹ-ն սահմանափակումների վայրերում: Ըստ էության, ԴՆԹ-ի նմուշը կոտրված է եւ մարսվում է սահմանափակման ֆերմենտներով: Արդյունքում բեկորները բաժանվում են ըստ իրենց երկարությունների եւ հատվածի չափսերի ձեւը տարբերվում է փորձարկված յուրաքանչյուր անհատի համար:

Ամբողջ RFLP գործընթացը պահանջում է զննումների պիտակավորում, ԴՆԹ-ի բեկորացում, էլեկտրոֆոռեզ, բլոտում, հիբրիդացում, լվացում եւ ավտորադիոգրաֆիա: Գտած RFLP- ն արտացոլվում է ռենտգենային ֆիլմի օգտագործմամբ աերոռադիոգրաֆի մեջ, որտեղ ԴՆԹ-ի բեկորները կարելի է դիտարկել եւ վերլուծել հետո, երբ դրանք բաժանվում են միմյանցից էլեկտրոֆորեզով:

RFLP վերլուծության համար դիմումներից մի քանիսը ներառում են.

Գենոմում տառացիության հայտնաբերման RFLP- ի օգտագործման տեխնիկան կենսական գործիք է գենոմի քարտեզագրման եւ գենետիկական հիվանդությունների վերլուծության մեջ: Եթե ​​որոշակի հիվանդության գենի գտնվելու վայրը որոշակի քրոմոսոմում փնտրվում է, ապա հետազոտողները կարող են վերլուծել ընտանիքի անդամների ԴՆԹ-ը հիվանդության հետ, ապա փնտրել ՌԴ-ի բոլոր ալելսի ժառանգության նմանատիպ օրինակները:

Երբ հիվանդության գենը տեղայնացված է, ընտանիքի այլ անդամների վերաբերյալ ՌԴՌՀ-ի վերլուծությունը կարող է հայտնաբերել մուտանտի գենի կրողը կամ ազդել ընդհանուր հիվանդության ռիսկի վրա: Կարեւոր է նշել, որ RFLP տեխնիկան լայնորեն օգտագործված չէ, այն է, որ նոր, ավելի առողջ մեթոդները կիրառվում են ԴՆԹ-ի վերլուծության համար դատական ​​գիտության եւ մի շարք այլ ոլորտներում:

Վերլուծության բացասական կողմը

Ցավոք, RFLP վերլուծության տեխնիկան ձանձրալի է եւ դանդաղ: ԴՆԹ-ի մեծ քանակության պահանջարկից բացի `նմուշը սովորաբար պետք է լինի եռամսյակի չափի մասին, որը համեմատաբար մեծ է ԴՆԹ-ի նմուշների համար. Պրոցեսը, ստուգման լաբիրինթոսից մինչեւ լվացքի եւ ավտորադիոգրաֆիա, կարող է տեւել մինչեւ ամբողջ ամսվա ավարտը:

Մարդու գենոմի նախագծի արդյունքները բավականին փոխարինեցին ՌԴՌՀ կարիքը: Ծրագիրը թույլ տվեց որոշել մարդկային բջիջներում հայտնաբերված ԴՆԹ-ի, մարդկային գենոմի ամբողջ հաջորդականությունը եւ մարդկային գենում բոլոր գեների հայտնաբերումը: